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細胞培養(yǎng)技術已經成為當今?命科學各領域的基礎技術和基本技能，它也是細胞?程、基因?程和?物醫(yī)學?程的重要研究?段。那我們在實際的動物細胞培養(yǎng)實驗中需要注意哪些基本要求呢？

今天再給?家講講正確接收培養(yǎng)狀態(tài)的活細胞的流程吧！購買的細胞收到后如何處理呢？還得分具體是什么類型的細胞。

收到培養(yǎng)狀態(tài)的活細胞

以接收培養(yǎng)狀態(tài)的293T細胞為例

01

檢查：細胞拿回實驗室后，先打開外包裝確認培養(yǎng)瓶?破損，培養(yǎng)基?溢出，若有異常，拍照留證；

若?異常，?75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表?，觀察細胞狀態(tài)，觀察細胞??狀況和有?污染現(xiàn)象。

?CELLImage Nano成像儀拍攝不同位置細胞的狀態(tài)圖

 

注意：若有任何問題，不要打開蓋?，拍照留證請?即通知細胞實驗室。確認?明顯問題后，因運輸問題，細胞會有不同程度影響，先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，放到培養(yǎng)箱靜置 4 ?時左右，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

02

靜置完成后，在4X或者10X鏡頭下對傳代或者換液細胞密度和細胞形態(tài)進?觀察，同時給剛收到的進?傳代或者換液的細胞拍照，（4X，10X）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照??張留存，作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態(tài)的依據(jù)。建議購買的細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞??狀態(tài)。

靜?4?時換液后?CELLImage Nano成像儀拍攝不同位置的細胞狀態(tài)

03

若為貼壁細胞：細胞??密度超過80%時，根據(jù)情況傳代，若細胞未超過80%容匯合度時，可對其培養(yǎng)基進?半換液處理，即吸棄?半的培養(yǎng)基，再加?等量的完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，直?細胞密度超過80%以后再進?傳代。

Readcells分析軟件計算出的融合度

位置1：融合度75%（第1張為原圖，第2張為融合度圖）

位置2：融合度95%（第1張為原圖，第2張為融合度圖）

位置3：融合度60%（第1張為原圖，第2張為融合度圖）

以上圖?均來?瑞奇科技實驗室

04

若為懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體轉移?離?管，1000RPM 離?5分鐘，棄去上清液，管底細胞沉淀加?1ml 完全培養(yǎng)基吹打、重懸。放?新的細胞培養(yǎng)瓶/?中培養(yǎng)過夜，根據(jù)細胞密度及??情況分瓶傳代。